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NtSKP1基因的反義載體構建及轉基因煙草的產生

時間:2023-04-26 19:30:00 工業(yè)農業(yè)論文 我要投稿
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NtSKP1基因的反義載體構建及轉基因煙草的產生

根據枯斑三生煙SKP1基因(NtSKP1)的序列,設計一對分別含有特定酶切位點的特異引物,以重組質粒pMD18-SKP1為模板,擴增目的基因(約473 bp)片段.將反向目的片段插入中間載體pHANNIBAL的內含子右側,再經NotⅠ酶切回收約3 443 bp的目的片段,插入到雙元載體質粒pART27中,成功構建了含NtSKP1基因片段反向序列的植物表達載體pART27-skp1a,其轉錄產物能減弱目的基因的表達.將pART27-skp1a 質粒導人根癌農桿菌LBA4404中并轉化煙草葉片細胞,經選擇分化培養(yǎng),獲得轉基因煙草.

作 者: 張付云 李偉 張瑛 孫秋穎 李研 杜昱光   作者單位: 張付云,李偉,張瑛,孫秋穎,李研(大連水產學院,大連,116023)

杜昱光(中國科學院大連化學物理研究所,遼寧省碳水化合物研究重點實驗室,大連,116023) 

刊 名: 生物技術通報  PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年,卷(期): 2010 ""(4)  分類號:   關鍵詞: NtSKP1基因   反義表達載體的構建   轉基因煙草   NtSKP1 gene   Construction of antisense expression vector   Transgenic tobacco  

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