漢灘病毒G1S0.7嵌合基因重組腺病毒的構建及鑒定

目的在本室前期工作的基礎上構建漢灘病毒M基因G1片段與S基因0.7kb片段嵌合基因的重組腺病毒.方法構建含有漢灘病毒G1S0.7嵌合基因的轉(zhuǎn)移載體pShuttle-G1S0.7,然后通過特異性的酶切將嵌合基因與腺病毒DNA相連,電轉(zhuǎn)化E.coli JM109,獲得重組腺病毒Adeno-G1S0.7 DNA,轉(zhuǎn)染HEK293細胞得到重組腺病毒.進一步對重組腺病毒的滴度和表達產(chǎn)物進行鑒定.結果構建的含G1S0.7嵌合基因的重組腺病毒,滴度可達1013～1015PFU/L;該重組腺病毒感染Vero-E6細胞后,表達出可被抗?jié)h灘病毒核蛋白及糖蛋白G1的特異性單抗(mAb)所識別的融合蛋白.結論利用腺病毒表達系統(tǒng),成功地表達同時具有核蛋白及糖蛋白G1生物學活性的融合蛋白,為進一步研究其免疫學特性奠定了基礎.

作 者： 張芳琳 劉勇 于瀾 胡剛 吳興安 史夢遠 白文濤 王海濤 徐志凱 ZHANG Fang-lin LIU Yong YU Lan HU Gang WU Xing-an SHI Meng-yuan BAI Wen-tao WANG Hai-tao XU Zhi-kai   作者單位： 第四軍醫(yī)大學微生物學教研室,西安,710032  刊 名： 免疫學雜志  ISTIC PKU 英文刊名： IMMUNOLOGICAL JOURNAL  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號： Q78  關鍵詞： 漢灘病毒   嵌合基因   重組腺病毒  

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