粉塵螨Ⅰ類變應原(Der fⅠ)的克隆表達、純化及免疫學特性

粉塵螨Ⅰ類變應原(Der fⅠ)是粉塵螨Dermatophagoides farinae主要變應原,可引發(fā)Ⅰ型變態(tài)反應.挑取純培養(yǎng)的粉塵螨,提取總RNA,采用RT-PCR方法有效地擴增出DerfⅠ片段,產(chǎn)物連接入T載體(pMD18).經(jīng)擴增后,用Nde Ⅰ和XhoⅠ雙酶切后將目的片段連接到pET24a表達載體上,得到重組質(zhì)粒pET24a-DerfⅠ,工程菌經(jīng)IPTG誘導培養(yǎng),高效表達出DerfⅠ蛋白,該蛋白主要以包涵體形式存在.表達產(chǎn)物經(jīng)親和層析純化,用Western blot及ELISA方法檢測免疫學活性,結(jié)果表明目的蛋白具有良好的免疫原性.

作 者： 朱健琦 劉志剛 高波 吉坤美 邢苗 ZHU Jian-Qi LIU Zhi-Gang GAO Bo JI Kun-Mei XING Miao   作者單位： 朱健琦,高波,ZHU Jian-Qi,GAO Bo(深圳大學生命科學學院,廣東,深圳,518060)

劉志剛,邢苗,LIU Zhi-Gang,XING Miao(深圳大學生命科學學院,廣東,深圳,518060;深圳市微生物基因工程重點實驗室,廣東,深圳,518060)

吉坤美,JI Kun-Mei(深圳市微生物基因工程重點實驗室,廣東,深圳,518060) 

刊 名： 昆蟲學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ENTOMOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 49(2)  分類號： Q966  關(guān)鍵詞： 粉塵螨   變應原   表達   純化   特性鑒定  

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